(Kā uzticams piegādātājs HANGZHOU JECI BIOCHEM piedāvā stabilu -ražošanu, augstas- kvalitātes NAD (nikotīnamīda adenīna dinukleotīdu, CAS 53-84-9), nodrošinot uzticamu izejvielu atbalstu IVD un vielmaiņas testu lietojumiem. Mūsu konsekventā produkcija un stingrā kvalitātes kontrole padara mūs par vēlamo partneri diagnostikas -pakāpes NAD piegādei.)
NAD (nikotīnamīda adenīna dinukleotīds) ir svarīgs koenzīms, kas dabiski atrodas šūnās un pastāv divās formās: oksidētā veidā (NAD⁺) un reducētā formā (NADH). To var savstarpēji pārveidot redoksreakcijās, regulējot dažādus bioloģiskos procesus, piemēram, šūnu enerģijas metabolismu un signālu pārraidi. NAD piedalās galvenajās enzīmu reakcijās, lai fiksētu metabolītu izmaiņas, un NAD un NADH līmeņa novirzes un to attiecības ir cieši saistītas ar daudzu slimību rašanos un attīstību. Tāpēc tas ir kļuvis par svarīgu marķieri klīniskai bioķīmiskai pārbaudei un agrīnai slimību skrīningam. Augstas-tīrības un augstas{5}}stabilitātes diagnostikas-klases NAD produktiem, kas ir galvenie izejmateriāli in vitro diagnostikas reaģentiem (IVD) un vielmaiņas testēšanas komplektiem, ir galvenā loma noteikšanas jutīguma un rezultātu uzticamības uzlabošanā.
Diagnostikas{0}}Grade NAD izstrādes vēsture
1906. gadā Arturs Hārdens atklāja "noslēpumainu koenzīma faktoru", kas veicina vielmaiņu, pētot rauga spirta fermentāciju (vēlāk izrādījās NAD).
1929. gadā Hanss fon Eilers{1}}Čelpēns identificēja NAD dinukleotīdu struktūru.
1930. gadā Otto Warburg izskaidroja redoksmehānismu starp NAD un NADH, precizējot, ka NADH uzrāda raksturīgu ultravioleto staru absorbciju pie 340 nm, savukārt NAD nav absorbcijas šajā viļņa garumā, tādējādi liekot teorētisko pamatu enzīmu pārbaudēm.
1948. gadā Horecker et al. apstiprināja NADH molāro ekstinkcijas koeficientu pie 340 nm, ļaujot tieši kvantitatīvi noteikt fermentu reakcijas ātrumu, izmantojot absorbcijas izmaiņas [1].
1961. gadā Olivers H. Lowry izveidoja NAD(P)/H cikla metodi, kas ir novatoriska audu/šūnu NAD(P)/H kvantitatīvā analīze.
No 1962. līdz 1963. gadam Boehringer Mannheim (vēlāk iegādājās Roche) laida klajā reaģentu komplektu, kas balstīts uz NADH 340 nm absorbcijas noteikšanu laktātdehidrogenāzei (LDH), panākot pirmo komerciālo diagnostisko -gradu NAD kā koenzīma izejmateriālu.
1973. gadā Bernofsky u.c. izveidoja ADH-PES-MTT pastiprināšanas sistēmas principu (ADH-PES-MTT kolorimetriskā sistēma) [2];同年, Kato et al. (Lowry Laboratory) izstrādāja ADH-MDH dual-enzīmu cikla metodi, kas ļauj ļoti jutīgi noteikt NAD/NADH [3].
Kopš tā laika diagnostikas{0}}pakāpes NAD ir kļuvusi par galveno izejmateriālu ikdienas bioķīmisko pārbaužu veikšanai, un tā ir nepārtraukti paplašināta, iekļaujot visprogresīvākās -slimības, piemēram, neirodeģeneratīvo slimību biomarķieru izpēti, audzēju metabolisma izsekošanu un novecošanas novērtēšanu.
Diagnostikas - pakāpes NAD lietojumprogrammu scenāriji
Galvenās izejvielas klīniskai bioķīmiskai diagnostikai
① Laktātdehidrogenāzes (LDH) noteikšana
Atklāšanas princips:
Laktāts+NAD+⟶LDHpiruvāts+NADH+H+
Lietojumprogrammu scenāriji: Kardioloģijas nodaļa (akūta miokarda infarkta diagnostika), Klīniskā laboratorija (hemolītiskās anēmijas diagnostika), Hepatoloģija (aknu šūnu bojājumu novērtējums) u.c.
Normāls LDH diapazons: 140 - 280 U/L (pieaugušie, starp metodēm pastāv atšķirības)
Klīniskā nozīme: > 280 U/L (norāda uz audu bojājumiem (aknu, sirds, nieru, muskuļu, plaušu utt.)), > 500 U/L (bieži novēro miokarda infarkta, hemolītiskās anēmijas, ļaundabīgo audzēju, smagu infekciju gadījumā).
② Malāta dehidrogenāzes (MDH) noteikšana
Atklāšanas princips:
Ābolskābe+NAD+⟶MDHoksaloetiķskābe+NADH+H+
Lietojumprogrammu scenāriji: Klīniskie reaģenti (mitohondriju slimību diagnostika), Zinātniskās pētniecības joma (mitohondriju funkciju izpēte) utt.
Normāls MDH diapazons: 12.5 - 50 U/L (dažādām laboratorijām ir nelielas atšķirības noteikšanas metožu un reaģentu dēļ)
Klīniskā nozīme: pacēlums norāda uz mitohondriju traumu, audu nekrozi utt.
③ Izocitrāta dehidrogenāzes (ICDH) noteikšana
Atklāšanas princips:
Izocītrskābe+NAD+⟶ICDH -Ketoglutārskābe+NADH+H+
Lietojumprogrammu scenāriji: Klīniskā mitohondriju slimību diagnostika, Zinātniskās pētniecības joma (aknu bojājumu novērtējums, enerģijas metabolisma izpēte) u.c.
Normāls ICDH diapazons: 1 - 5 U/L (serums)
Klīniskā nozīme: pacēlums norāda uz mitohondriju traumu, hepatocītu bojājumu, audu nekrozi utt.
④Kreatīnkināzes (CK) noteikšana
Atklāšanas princips:
Fosfokreatīns+ADPGlikoze+ATPG-6-P+NAD+⟶CKKreatīns+ATP⟶HKG-6-P+ADP⟶G6PDH6PG+NADH
Pieteikšanās scenāriji: Kardioloģijas nodaļa (akūts miokarda infarkts, miokardīts), Ortopēdijas/neatliekamās palīdzības nodaļa (muskuļu traumas, rabdomiolīze), Neiroloģija (miopātija) u.c.
Normāls CK diapazons: vīrieši 38 - 174 U/L; Sievietes 26 - 140 U/L (atšķirības starp metodēm)
Klīniskā nozīme: paaugstināts līmenis norāda uz miokarda vai skeleta muskuļu ievainojumu, ko parasti novēro miokarda infarkta, miokardīta, rabdomiolīzes, smagas fiziskās slodzes utt.
⑤Glikozes noteikšana
Atklāšanas princips:
Glikoze+ATPG-6-P+NAD+⟶HKG-6-P+ADP⟶G6PDH6PG+NADH
Pielietojuma scenāriji: endokrinoloģija (diabēta diagnostika un glikozes līmeņa kontrole asinīs), neatliekamās palīdzības nodaļa (hipoglikēmiskā koma, hiperglikēmijas ārkārtas diagnostika), kritiskās aprūpes medicīna (ICU pacientu glikozes līmeņa kontrole asinīs) utt.
Normāls glikozes līmenis: tukšā dūšā 3.9 - 6.1 mmol/L; 2 stundas pēc ēšanas < 7,8 mmol/L
Klīniskā nozīme: paaugstināts līmenis tiek novērots cukura diabēta, stresa hiperglikēmijas gadījumā; Samazināts līmenis tiek novērots hipoglikēmijas, insulinomas, smagas aknu slimības utt.
⑥Laktāta noteikšana
Atklāšanas princips:
Laktāts+NAD+⟶LDHpiruvāts+NADH+H+
Pielietojuma scenāriji: Neatliekamās palīdzības nodaļa (šoka/audu hipoksijas novērtējums), ICU (pēc - kritisko pacientu glābšanas spriedums), Kardioloģijas nodaļa (sirds mazspēja), Infekcijas slimības (sepse), Sporta medicīna (sportistu fizisko spēju novērtējums) utt.
Normāls laktāta diapazons: 0.5 - 2.2 mmol/L (venozās asinis)
以下是图片内容的英文翻译,严格保持原格式:
⑦ Galaktozes noteikšana
Atklāšanas princips:
-D-Galaktoze+NAD+⟶GalDHGalaktonskābe+NADH+H+
Lietojumprogrammu scenāriji: jaundzimušo skrīnings (galaktosēmijas diagnostika), pediatrija (iedzimtas vielmaiņas kļūdas), gastroenteroloģija (laktozes nepanesības noteikšana), hepatoloģija (aknu funkciju novērtējums) u.c.
Normāls galaktozes diapazons: serums tukšā dūšā: < 0,28 mmol/L; Jaundzimušajiem: < 1,11 mmol/L
Klīniskā nozīme: Paaugstināts līmenis tiek novērots galaktoēmijas, aknu mazspējas, iedzimta galaktozes metaboliskā enzīma deficīta gadījumā utt.
⑧ Etanola noteikšana
Atklāšanas princips:
Etanols+NAD+⟶ADHacetaldehīds+NADH+H+
Lietojumprogrammu scenāriji: Neatliekamās medicīniskās palīdzības nodaļa (akūtas saindēšanās ar alkoholu diagnoze), fiziskās apskates centrs (vadītāja alkohola pārbaude), tiesu medicīniskā identifikācija (alkohola koncentrācijas noteikšana asinīs) u.c.
Normāls etanola diapazons: 0 mmol/L (nedzērāji)
Klīniskā nozīme: paaugstināts līmenis liecina par alkohola lietošanu vai saindēšanos ar alkoholu; pārmērīgi augsta koncentrācija var izraisīt centrālās nervu sistēmas nomākumu, elpošanas un asinsrites inhibīciju.
⑨ -Hidroksibutirāta noteikšana
Atklāšanas princips:
-Hidroksisviestskābe+NAD+⟶ -HBDHAcetoetiķskābe+NADH+H+
Lietojumprogrammu scenāriji: endokrinoloģija (diabētiskās ketoacidozes diagnostika), uzturs (uztura uzņemšanas uzraudzība) utt.
Normāls -hidroksibutirāta diapazons: Asinis tukšā dūšā: < 0,27 mmol/L (atšķirības starp metodēm)
Klīniskā nozīme: paaugstināts līmenis norāda uz diabētisko ketoacidozi, badu, ilgstošu badošanos,{0}}alkoholisko ketoacidozi utt.
以下是图片内容的英文翻译,严格保持原格式:
⑨ -Hidroksisviestskābes noteikšana
Atklāšanas princips:
-Hidroksisviestskābe+NAD+⟶ -HBDHAcetoetiķskābe+NADH+H+
Lietojumprogrammu scenāriji: endokrinoloģija (diabētiskās ketoacidozes diagnostika), uzturs (uztura uzraudzība) utt.
Normāls -hidroksisviestskābes diapazons: Asinis tukšā dūšā: < 0,27 mmol/L (atšķirības starp metodēm)
Klīniskā nozīme: paaugstināts līmenis norāda uz diabētisko ketoacidozi, badu, ilgstošu badošanos,{0}}alkoholisko ketozi utt.
Biomarķieri slimību novērtēšanai
NAD kā slimības novērtēšanas biomarķieris pašlaik atrodas klīniskās tulkošanas stadijā. 2022. gadā NADMED Q-NADMED Blood NAD⁺/NADH noteikšanas komplekts kļuva par pasaulē pirmo NAD noteikšanas produktu, kas ieguva CE-IVD sertifikātu (In vitro diagnostikas medicīnas ierīču direktīva). Tas nosaka NAD⁺ un NADH koncentrāciju cilvēka asinīs ar NAD⁺ noteikšanas robežām: 330 nM; NADH: 119 nM. NAD⁺ koncentrācija veselu pieaugušo asinīs ir aptuveni 18 μM (diapazons: 15–23 μM) [4], ko izmanto pilnu asiņu kvantitatīvai noteikšanai un NAD prekursoru terapeitiskās iedarbības uzraudzībai. Tomēr tas vēl nav apstiprināts kā neatkarīgs slimības diagnostikas kritērijs.
Zinātniskās izpētes jomā tiek padziļināti pētīta NAD/NADH attiecības iespējamā vērtība cerebrospinālajā šķidrumā vai asinīs neirodeģeneratīvās slimībās (piemēram, Alcheimera slimība, Parkinsona slimība), audzēju metabolisms un novecošanās novērtējums [5–8], taču šobrīd to galvenokārt izmanto klīniskajos pētījumos un zinātniskās izpētes pētījumos, nevis rutīnas klīniskajā diagnostikā.
>Diagnostikas{0}}pakāpes NAD tirgus ainava<
Pašlaik globālais diagnostikas{0}kategorijas NAD tirgus atrodas straujas attīstības stadijā, ko veicina tehnoloģiju un pieprasījuma pieaugums. Nozare strauji pāriet no importa{2}}uz vietējai aizstāšanai. In vitro diagnostikas jomā ir vērojama strukturāla diferenciācija: lai gan kopējais reaģentu komplektu skaits ir samazinājies, vadošie uzņēmumi (piemēram, Roche Diagnostics, Mindray Medical) paliek stabili un izvēršas jaunos projektos, piemēram, vielmaiņas testēšanā un novecošanās novērtēšanā, savukārt mazie un vidējie uzņēmumi samazina ražošanas līnijas peļņas spiediena dēļ.
Galvenie diagnostikas -kategorijas NAD piegādātāji ir: Roche, Oriental Yeast, SunClone Bio, Shenzhen Bangtai u.c.
Atsauces
[1] HORECKER BL, KORNBERG A. Piridīna nukleotīdu reducētās joslas ekstinkcijas koeficienti[J]. J Biol Chem, 1948, 175(1): 385 - 90.
[2] BENFORSKY C, SWAN M. Uzlabots nikotīnamīda adenīna dinukleotīda [J] cikla tests. Anal Biochem, 1973, 53(2): 452 - 8.
[3] KATO T, BERNTSEN O, CARTER S u.c. Enzīmu cikla metode nikotīnamīda - adenīna dinukleotīdam ar ābolskābes un alkohola dehidrogenāzēm[J]. Anal Biochem, 1973, 56(2): 392 - 8.
[4] NATALIA V Balshova, Lev G Zavileysky, Artem V Artukhov u.c. NAD⁺ efektīva pārbaude un marķiera nozīme cilvēka asinīs [J]. Front Med, 2022, 9, 886645.
[5] LAN Z P. Jauna biomarķieru noteikšanas sistēma un tās pielietojums Ķīnā [Patents]. Ķīna, 119560018A[P]. 2024 - 11 - 12.
[6] YAN L, SUN MR, WU J u.c. Fluorescējošās zondes veids pirimidīna nukleozīdu noteikšanai un tās sagatavošanas metode un pielietojums: Ķīna, 117887460A[P]. 2025 - 09 - 02.
[7] JIN LP, ZHAO X, LU Y u.c. Nikotīnamīda adenīna dinukleotīda un tā metabolītu hromogēnā noteikšana, izmantojot piridīna nukleozīdus kā kofaktorus, un tās pielietojums fermentatīvo šķidrumu diagnostikā vai ārstēšanā[J]. Ķīna, 112694070A[P]. 2023 - 12 - 22.
[8] HONG J, HAN ZW, NING XQ u.c. NAD⁺ kā molekulārā marķiera pielietojums pielāgotai produktu izstrādei sieviešu dzimumorgānu diskomforta diagnosticēšanai[J]. Ķīna, 118109777A[P]. 2024 - 05 - 10.
